黄曲霉毒素免疫亲和柱

GB5009.22-2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》GB5009.24-2016《食品中黄曲霉毒素M族的测定》满足新国标检出限，更严格质量标准

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黄曲霉毒素是一种毒性极强的有毒物质，其危害性在于对人及动物内脏组织有破坏作用。黄曲霉毒素免疫亲和柱以 抗原-抗体特异性反应为基础，将抗体键合在凝胶上，使其与黄曲霉毒素特异性结合，从而实现分离净化的效果。

相关标准：

GB5009.22-2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》

GB5009.24-2016《食品中黄曲霉毒素M族的测定》满足新国标检出限，更严格质量标准

应用实例

添加水平为0.25 ug/kg 大米中黄曲霉毒素总量的液相色谱图

注意事项：

1、黄曲霉毒素对人体有害，应戴手套操作。

2、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液用5%浓度的NaClO溶液浸泡过夜。

3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。

4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存，不可冻存。

5、使用前，免疫亲和柱需回至室温（22-25℃）。

6、取样量：根据实际情况可以适当增减，但不可太少，同时提取液体积要按比例随之改变。

7、pH：上柱液pH要在6~8之间，若偏离此范围需要HCl或NaOH调节pH。

需要的材料但盒中不提供：

试剂配制：

1、提取液：80%CH3OH 移取800mL CH3OH，加一级水200mL混合。

2、PBA溶液：称取8.00gNaCl，1.20g Na2HPO4，0.20g KH2PO4，0.20gkcl，用900mL蒸馏水溶解，然后用HCl调节pH值至7.4，后用蒸馏水稀释定容至1000mL。

样品处理：真菌毒素分析的误差来源是样品的收集和取样过程，所以要保证样品收集和取样的代表性。

（一）一般固体样品（稀释倍数：2倍）

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、加20.0mL提取液，涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）；

3、在5000r/min下离心10min（或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）；

4、取滤液4ml，加入24ml PBS溶液，混匀（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）

（二）植物油脂（稀释倍数：2倍）

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、加20.0mL提取液，涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）；

3、5000r/min离心10min，取上清液备用；

4、取滤液4ml，加入24ml PBS溶液，混匀，（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）

（三）酱油、食醋（稀释倍数：2倍）

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、用提取液定容至25ml（精确至0.1mL），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）

3、在5000r/min下离心10min（或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）；

4、取滤液4ml，加入，加入24ml PBS溶液，混匀，（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）

操作程序：符合国标GB 5009.22-2016

1、连接:将免疫亲和柱后盖取下，用剪刀剪开，重新盖上，连接于泵流操作架的30mL注射器下；

2、上样:移取上述提取液移至注射器内，打开下端堵头；

3、富集:将空气压力泵与注射器连接，调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱，建议重力过柱；

4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗，弃去全部流出液，并使2-3mL空气通过柱体；

5、洗脱:为保证洗脱充分，以2.0mL色谱级CH3OH进行洗脱，重力洗脱即可。首先，将免疫亲和柱内液体排干，加1.0mLCH3OH于柱管内，重力过柱，当溶剂通过柱子后；再加入1.0mLCH3OH重复上述洗脱步骤，后轻微加压排净洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液浓缩吹干，用1mL流动相复溶，涡旋30s溶解残余物，0.22μm滤膜过滤，待测。

操作流程图示

本公司可提供的真菌毒素检测产品