胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-VAD-FMK

简要概述

Z-VAD-FMK是细胞可渗透的不可逆半胱天冬酶抑制剂，与半胱天冬酶蛋白的催化位点结合，可抑制凋亡的诱导。为了抑制细胞凋亡，应在诱导细胞凋亡的同时添加Z-VAD-FMK。该肽在天冬氨酸的P1位置被O-甲基化，提供增强的稳定性和更高的细胞通透性。FMK衍生的肽可作为有效的不可逆抑制剂，而不会增加细胞毒性作用。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Z-VAD-FMK。 

产品说明书

样品实验方案

以下是我们推荐的方案，仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。

溶液配制

储备溶液配制

Z-VAD-FMK储备溶液配制：在Z-VAD-FMK中添加适量的DMSO，制成2-5 mM Z-VAD-FMK储备液。注意：将未使用的Z-VAD-FMK储备溶液分装在-20°C下。

操作步骤

1. 根据需要处理样品以诱导凋亡。

2. 添加Z-VAD-FMK。
   注意：我们建议使用浓度为10-100 µM的Z-VAD-FMK抑制胱天蛋白酶，例如对caspase-8抑制50 µM。
   注意：孵育的时间和浓度需要通过实验确定。

3. 根据需要对样品染色。

4. 用适当的仪器检测荧光强度。 

图示

图1.用半胱天冬酶抑制剂Z-VAD-FMK（Cat＃13300）抑制Jurkat细胞中的胱天蛋白酶活性。当天，将Jurkat细胞以200,000个细胞/ 90 µL /孔的密度接种在Costar黑色96孔板中。用1 µM星形孢菌素处理细胞5小时。加入Z-VAD-FMK（50 uM）并与星形孢菌素共孵育。用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒（Cat#22816）检测caspase-8活性。用Flexstation 3荧光酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em ＝ 540 / 620nm（截止＝ 610nm）下测量荧光强度。