仑昌硕生物      小鼠环氧化酶2（COX-2）elisa试剂盒

   目的 探讨白介素12B(IL-12B)基因多态性位点rs6887695与汉族人寻常性银屑病临床表型(发病年龄、家族史、临床类型、性别)的相关性.方法 采用ABI Taqman探针荧光PCR技术,对575例寻常性银屑病患者和1403例健康对照的DNA样本进行IL-12B基因多态位点rs6887695的基因分 型.使用SPSS14.0分析软件,x2检验比较患者组和健康对照组间、不同临床表型组间的基因型和等位基因频率分布的差异性.结果 IL-12B基因多态性位点rs6887695三种基因型(GG、GC、CC)频率在寻常性银屑病患者组分别为42.61％、45.39％和12.0％, 健康对照组分别为34.42％、47.83％和17.75％;等位基因频率(G、C)患者组分别为65.30％和34.70％,健康对照组分别为 58.34％和41.66％,基因型和等位基因频率分布在患者组和健康对照组间差异均有统计学意义(x2值分别为16.31和16.54,P值均 ＜0.01),在慢性斑块状(543例)和 急性滴状银屑病患者(32例)组间的差异均有统计学意义(x2值分别为18.11和12.19,P值均＜0.01).等位基因G和基因型GG在患者组中的 频率明显高于健康对照组,等位基因G和基因型GG在斑块状患者中的频率高于滴状患者.少儿发病组(35例)与成人发病组(540例)、家族史阳性组 (102例)与家族史阴性组(440例)、男性患者组(341例)与女性患者组(234例)的基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义(P值 均> 0.05).结论 IL-12B(rs6887695)基因多态性与汉族人寻常性银屑病易感性相关联,特别是与斑块状银屑病相关,但与患者的发病年龄、家族史及性别可能无关 联.

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      目的:探讨多器官功能不全(MODS)小鼠在伤后不同时相点白介素-12(IL-12)水平的变化趋势及其与创伤后免疫失衡的关系.方法:选择6~8周龄雄性C57BL/6小鼠96只,随机分为正常组,伤后3~24h组、3~7d组和12d组.腹腔注射酵母多糖复制MODS动物模型,用间接酶标法行IL-12p40的免疫组织化学标记,采用ELISA法分别检测血清与组织匀浆上清中IL-12p40和IL-12p70的水平,流式细胞术检测外周血T细胞亚群.结果:在MODS病程早期和晚期的"两次打击"中,小鼠组织与血清中IL-12p40含量显著增多,IL-12p70相对减少,同时伴有CD4/CD8比值下降.结论:MODS小鼠发生免疫抑制可能与免疫器官中抗原提呈细胞高表达IL-12p40有一定相关性.和蛋白激酶B (Akt)酸化在该过程中的作用.[方法]使用不同浓度的PQ (0,1,3.3,10,33,100nmol·L-1)对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞进行染毒12 h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力.选择不引起细胞活性改变的染毒剂置(33umol·L-1)进行后续研究

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       目的筛选获得慢病毒介导的分泌表达小鼠白介素12(mIL-12)的间充质干细胞株.方法采用PCR反应从pORF-mIL-12中扩增得到mIL-12基因的完整序列, 人pENTR^TM11质粒,构建含小鼠IL-12基因的重组质粒pENTR-mIL-12,与pLenti6/V5-Dest质粒进行细胞外重组,得到pLenti6/V5-mIL-12质粒,经PCR,多酶切鉴定正确后送Invitrogen公司上海分公司测序;用293FT细胞进行病毒包装,得到具有感染性的病毒;分离小鼠间充质于细胞,用杀稻瘟素筛选Lenti—mIL-12-MSC的稳定表达株,并鉴定.结果构建了重组质粒pENTR-mIL-12和pLenti6/V5-mIL-12,测序结果与GenBank收录序列一致,未发生突变;包装得到Lenti6/V5-mIL-12病毒;筛选得到稳定表达的Lenti—mIL-12-MSC细胞株,并用RT-PCR方法及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测验证了mIL-12体外表达.结论筛选得到稳定表达mIL-12的间充质干细胞株.

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