仑昌硕生物     小鼠6*酸果糖2激酶；果糖-2,6-二*酸酶3（PFKFB3）elisa试剂盒

   目血清淀粉样蛋白P(SAP)呈糖基化(蛋白),在血清中以两个五聚圆盆状的复合体存在.SAP 由合成,半衰期为7.8～8.5小时,说明SAP 产生快速而持续以维持血清中稳定浓度在40～50mg/L.为更好了解SAP 的功能,需要快速的测定方法.本文介绍ELISA 测定人SAP 浓度.方法如下:用经蛋白A 层析柱和SAP(琼脂糖CL-4B 柱纯化的抗SAP 包被.同一抗体用辣根过氧化物酶标记作为二抗.反应板每孔中加100μl抗SAP 抗体(20mg/L)溶液,放25℃16～18小时,递经洗涤加100μl 受检标本温育洗涤后,加100μl 标记抗体,按常规洗涤,于492nm 波长读取吸光度.本目的利用蛋白质组学技术研究胃癌血清淀粉样蛋白A的变化及临床意义.方法应用表面加强激光解析(SELDI)技术检测胃癌血清中相对分子质量11100-11900的一簇蛋白蜂,采用液相色谱(HPLC)技术分离该簇蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)分析该簇蛋白的肽指纹图,经数据库搜索进行鉴定分析

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      目的:采用载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)雄鼠,给予高脂饲料喂养,构建动脉粥样硬化模型,观察血脂变化及主动脉全长动脉粥样硬化斑块形成.方法:选取饲养于SPF屏障环境内8周龄的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)雄鼠18只,随机分成对照组(9只)和实验组(9只).实验前对两组雄鼠进行鼠尾基因型鉴定,并随机抽取6只,测得8周龄对照组小鼠血脂.实验组给予高脂饲料(脂肪15%,胆固醇1.25%,0.5%胆酸盐);对照组予普通饲料,饮水不限.分别在喂养0周,8周时眼眶采血,测血脂.两组小鼠均在饲养8周处死,处死前12 h禁食不禁水,取主动脉全长,油红O染色,观察主动脉病理变化.成功建立AS模型后,将小鼠分为AS+生理盐水(NS)组及AS+辛伐他汀(ST)组(各9只),分别在给药4周及8周时眼眶取血,测血清中血脂浓度变化.结果:对小鼠鼠尾基因型鉴定确定ApoE基因敲除雄鼠均为阳性纯合子小鼠,且Neo cassette已被去除.通过对ApoE基因敲除雄鼠实验组及对照组血脂比较,表现为TG,TC和LDL-C显著升高(P<0.05),HDI-C(P<0.05)显著降低;实验组高脂饲料喂养8周后,ApoE基因敲除雄鼠主动脉形成明显的AS斑块,对照组则未见明显AS斑块.AS小鼠给予NS和ST后,检测表明ST给药时间增长,TC,TG,LDL-C均有降低趋势.其中,TC及LDL-C给药ST 8周后有显著性差异(P<0.05),小鼠主动脉油红O染色显示斑块脂质沉积较NS组有所减少,面积减小,凸向管腔程度也明显降低(即狭窄程度降低).结论:ApoE基因敲除雄鼠高脂饲料喂养8周后,血脂明显异常,且形成明显的AS斑块,AS模型成功构建;AS小鼠给予ST(8周)则血脂浓度明显降低,且主动脉油红染色显示斑块明显少于对照组,表明该模型可用于抗动脉粥样硬化药效检测.

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       目的:研究血清淀粉样蛋白P(SAP)在3种常见结缔组织病患者血清中含量,探讨其在结缔组织病发展中的作用及意义.方法:用ELISA方法测定正常人,系统性红斑狼疮活动期和缓解期,类风湿关节炎活动期和缓解期,初治干燥综合征等风湿性疾病血清中血清淀粉样蛋白P(SAP)含量.统计各型患者血清中血清淀粉样蛋白P(SAP)的表达水平及其意义.结果:SAP在系统性红斑狼疮患者活动期血清中高表达,且其表达水平显著高于缓解期和正常人,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:血清淀粉样蛋白P(SAP)在系统性红斑狼疮活动期高表达,可以作为系统性红斑狼疮患者活动期的诊断指标之一.血清淀粉样P蛋白(SAP),与C反应蛋白(CRP)构成Ca2+依赖性配体结合的血清正五聚体蛋白家族,SAP和CPR参与固有免疫和炎症反应、机体淀粉样病变等,表明具有重要生理病理功能,但它在动脉粥样硬化中的作用尚不清楚。有报道在一些心血管疾病患者的血清中SAP的浓度显著上

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