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可同时中国又是人口大国,这就导致了中国人均占有的畜产品数量还依然很少.然而伴随着人们生活水平的逐渐提高,对 畜产品尤其是优质的肉类产品的需求越来越高,这就要求研究者们进一步研究出高产量,高品质的畜产品.肌生成抑制素(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族的成员之一,是骨骼肌生长的负调控因子,因其与"双肌性状"关系密切而被广泛关注,该基因的缺失或突变能够引起所编码的蛋白质失活,进而消除其对骨骼肌生长的抑制作用,导致其不能调节肌纤维的降解活动造成肌肉的增生和肥大.由此看来,Myostatin基因与家畜的肉质和胴体性状密切相关.本实验主要研究肌生成抑制素Myostatin基因的融合表达质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响. 本实验首先利用巢式PCR的方法扩增出肌生成抑制素Myostatin基因的编码区,并将该片段连入到乙肝表面抗原HBsAg基因的3'末端,用以增加其免疫原性.而后将其连接到真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2上,成功得到肌生成抑制素与乙肝表面抗原融合表达质粒pEF1α-DsRed-S-MSTN.将该融合质粒转染到牛胎儿成肌细胞中,利用荧光定量PCR技术以及western blot技术检测得知,该真核表达载体能够在牛胎儿成肌细胞中表达.而后,又以3周龄的昆明小鼠为实验对象,用基因免疫的方法检验该融合质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响.实验结果表明,用ELISA检测免疫后小鼠血清内生长激素和甘油三酯水平可知,在9周龄时实验组小鼠生长激素高于对照组,且其后又继续有升高趋势.以期进一步可以为高肌肉产量肉牛的培育做出一定的贡献,但是更复杂具体的调控作用还需要进一步的实验研究.

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为了探讨肌肉质量负调控因子肌肉生长抑制素(myostatin)在低氧和运动调控骨骼肌质 量中的作用,将SD大鼠分为常氧对照组,常氧运动组,低氧暴露即刻组,高住低训即刻组,低氧暴露复氧1周组,高住低训复氧1周组.运动方式为跑台运动.采 用人工模拟氧浓度13.6%的低氧环境进行间歇性低氧暴露,每天晚上在氧浓度13.6%低氧舱内低氧暴露12h,共4周,实验后取腓肠肌称重,采用RT- PCR方法测定腓肠肌myostatin mRNA的表达.结果表明:1)与常氧对照组比,高住低训即刻组体重显著下降,腓肠肌质量显著下降(P〈0.05);2)与常氧对照组比,常氧运动组骨骼 肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05);3)4周低氧暴露后骨骼肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05),复氧1周后被完全抑制;4)4周高住低训后骨骼肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05),复氧1周后被完全抑制.高住低训后骨骼肌质量丢失,myostatin mRNA表达上升.提示高住低训调节骨骼肌质量可能与运动,低氧调控骨骼肌myostatin水平有关.

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2．间接法测定抗体

将抗原吸附于固相载体表面；

 加抗体, 形成抗原-抗体复合物；

 加酶标抗体；

 加底物。 测定底物的降解量＝抗体量。

 3．双抗体夹心法测定抗原

将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;

加抗原，形成抗原-抗体复合物;

加抗原免疫种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;

加酶标抗抗体(种动物抗体的抗体);

加底物。底物的降解量＝抗原量。

 4. 竞争法测定抗原

 将抗体吸附在固相载体表面;

(1) 加进酶标抗原；

(2),(3)加进酶标抗原和待测抗原；

加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。

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 厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为体的生物技术公司，目可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清、动物抗血清等品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设，我们内部采用了先进的信息处理平台，保证客户的需求可以准确、处理。公司成立之初，立足外贸，和部分欧美及亚非国家的客户建立了良好的合作，随着国内生物域的蓬勃发展，逐步把重心转移到国内来，为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

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