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   目的:低分子量透明质酸(LMMHA)是透明质酸快速转化和降解的结果。越来越多的数据已证实LMMHA参与肺部炎症疾病,但是LMMHA(200 kDa)诱导早期肺部炎症的信号通路尚未完全研究。所以探究LMMHA(200 kDa)诱导肺部炎症的PI3K以及其下游的信号通路是非常有意义的,以期为理解肺疾病的分子机制提供一个新的视角。方法:通过气管内给药LMMHA(200 kDa、65 mg/kg)来模拟体内LMMHA大量产生的应激环境。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行总细胞和中性粒细胞计数测定。质形成细胞衍生趋化因子(KC)和基质金属蛋白酶-9前体(pro-MMP9)的表达水平。在LMMHA诱导的肺部炎症分子机制研究中,采用Akt1基因敲除鼠,或先使用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性阻断剂wortmannin和LY294002,PKCδ特异性抑制剂r信号之间的关系。结果:(1)气管内给药LMMHA(200 kDa)能够诱导小鼠肺泡灌洗液中总细胞和中性粒细胞数量以及炎症介质IL-6、KC以及pro-MMP9的表达水平显著上升,并引起MPO活性增加以及大量中性粒细胞浸润到肺组织中进中性粒细胞浸润、聚集以及炎症介质释放,使炎症反应加重。本实验的研究次证明使用PI3K或PKCδ的制,或敲除Akt1基因均可减轻LMMHA诱导的肺部炎症反应。并且PI3K/Akt1通路参与LMMHA诱导的肺部炎症反应,主要通过上调Mcl-1的表达来抑制中性粒细胞的凋亡。因此,阻断PI3K/Akt1通路或PKCδ信号对LMMHA诱导的肺部炎症反应起保护作用。这些新的发现揭示了一种新的无菌炎症分子机制,并为治疗肺部疾病提供了一个新的潜在靶点。

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      目的:本研究旨在通过体内和体外实验建立在小鼠脓毒症模型中检测中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的方 法,并初步探讨其与脓毒症肺组织损伤的相关性.方法采用盲肠结扎穿孔手术建立脓毒症小鼠模型,以假手术小鼠作为对照组.术后7 d,采用PicoGreen?染料定量检测小鼠血浆游离DNA,采用髓过氧化物酶(MPO)-DNA ELISA检测小鼠外周NETs复合物的形成,反映NETs生成量.对脓毒症小鼠的肺组织进行病理分析,反映肺组织损伤情况.采用免疫荧光染色法对肺组织 原位的NETs形成情况进行鉴定.结果与对照组相比,脓毒症小鼠血浆中游离DNA含量(1650 ng/ml)显著升高(t =21.91,P =0.0021).MPO-DNA复合物水平(4.85倍)也显著升高(t =15.40,P=0.0042).脓毒症小鼠的肺组织可见明显损伤,免疫荧光检测显示脓毒症小鼠肺部的NETs形成增加.结论在小鼠中建立了稳定的 NETs形成情况鉴定方法,且肺部NETs形成增加是脓毒症模型小鼠肺组织损伤的原因之一.

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       小鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用.药品名称:通用名:小鼠透明质酸(HA)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,或其它相关组织液中透明质酸(HA)含量.实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠透明质酸(HA)水平.用纯化的小鼠透明质酸(HA)抗体包被微孔板,往微孔中依次加入透明质酸(HA),再与HRP标记的透明质酸(HA)抗体结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色.颜色的深浅和样品中的透明质酸(HA)呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠透明质酸(HA)浓度.试剂盒组成 1 20倍浓缩洗涤液 30ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(900μg/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

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     厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清，动物抗血清等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域

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