产品参数

产品概述

SoNa 520 AM 是 SoNa™ 520 的细胞渗透版本，用于监测活细胞中的钠离子。 SoNa™ 520 是一种新型钠敏感荧光指示剂染料，用于检测生物样品中的钠含量。它是一种荧光染料，与钠离子结合后荧光强度大大增强。通过测量发射的荧光强度，研究人员可以评估生物样品中的钠离子浓度或研究钠离子在生物刺激下如何变化。与其他众所周知的荧光钠离子指示剂（例如 SBFI 和Corona Red）相比，它可能具有高的检测灵敏度。它可用于测量活细胞和其他生物样品中钠浓度的变化。与常见的 SBFI 相比，SoNa™ 520 更加灵敏，在相同条件下具有更大的荧光响应。此外，SoNa™ 520 可以用可见 488 nm 激光或类似的可见光很好地激发，以避免激发 SBFI 所需的紫外线激发。一般来说，紫外线激发会对细胞和其他生物样品造成巨大损害，并且比可见光更快地光漂白染料探针。钠离子指示剂的使用使科学家能够研究与钠相关的各种生理过程，例如钠离子通道活性、细胞信号传导和钠稳态。 百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钠离子荧光探针。

适用仪器

实验方案

溶液配制

储备溶液配制

SoNa™ 520 AM 储备溶液配制

在高质量无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM SoNa™ 520 AM 储备溶液。

工作溶液配制

SoNa™ 520 AM 工作溶液配制

实验当天，将 SoNa™ 520 AM 溶解在 DMSO 中，或将等份指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液（例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制备 2 至 20 µM 的染料工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度为 5-10 μM 的 SoNa™ 520。细胞加载所需指示剂的准确浓度必须根据经验确定。

注意：非离子洗涤剂 Pluronic® F-127 有时用于增加 SoNa™ 520 AM 的水溶性。可以从百萤购买各种 Pluronic® F-127 溶液。

注意：如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的浓度为 0.5-1 mM），以减少脱酯指示剂的泄漏。各种 ReadiUse™ 丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从百萤购买。

操作步骤

以下是我们推荐的将 AM 酯加载到活细胞中的方案。该步骤仅提供指导，实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在生长培养基中培养细胞过夜。

2.过24小时，将 1X SoNa™ 520 AM 工作溶液添加到细胞板中。

注意：如果您的化合物干扰血清，请在上样前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。

3.将载有染料的孔板/培养板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 1 至 2 小时。

注意：孵育染料超过 2 小时可以提高某些细胞系的信号强度。

4.用 HHBS 或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，例如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。

5.根据需要添加刺激剂，同时使用配备 FITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation）的荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm 处测量荧光。

图示

图示：1. HeLa 细胞中短杆菌肽 A 对不同钠离子浓度的反应。 HeLa 细胞以 40,000 个细胞/100 µL/孔的密度过夜接种在 96 孔 Costar 板中。添加 100 µL SoNa™ 520 AM 或 SBFI-AM（含 0.02% PF-127 的 HHBS），并将细胞在 37 °C 下孵育 1 小时。将染料上样介质替换为含有短杆菌肽 A（0、40 和 140 mM 钠离子）的 100 µL HHBS。 30 分钟后，使用带有 FITC 通道的荧光显微镜（Olympus IX71）捕获图像。

参考文献

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