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伤口愈合实验/划痕实验怎么制造笔直的划痕?
传统伤口愈合实验的方法是:
用头划过单层细胞,制造出划痕再观察细胞“愈合”的情况。
实验方法缺陷:
1.人工制造的“划痕”很难保证一致性,实验重复性差;
2.手动划痕可能会划伤培养器皿表面的包被,进而影响实验结果。
ibidi 实验方法:
伤口愈合插件 (culture-insert)
优势:
*设计精巧,操作简单;
*生物相容性硅胶制成的插件,静电吸附,一般平滑的表面都能吸附;
*划痕一致性好,产生确定的500μm “划痕”区域;
*实验可重复性高;
*细胞用量少,节省培养基;
*细胞无损伤;
*标准化的数据分析方法恰恰弥补了传统实验方法的不足。
应用:
1.伤口愈合实验
2.细胞迁移实验
3.2D侵袭实验
4.细胞共培养
操作步骤:
其他应用:
1. 二维侵袭实验:
2. 共培养:
特点:
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。
4. 研究细胞迁移的体外实验中简单的方法。
ibidi 培养插件与传统划痕实验比较
ibidi 培养插件提供重复性更好的实验结果:
左图是伤口愈合插件做出的实验数据统计;右图是头划痕做出的实验数据统计
实验结果分析
配套数据分析:
伤口愈合成像分析– WimScratch
可快速分析伤口愈合和细胞迁移实验
分析原理:通过计算“gap”的面积,进而计算细胞愈合速率。
1. 完整解决伤口愈合实验:从实验到分析;
2. 客观的和可再生分析,避免人为选取测量点的主观因素影响;
3. 简单并且快速的数据处理-几分钟出结果;
4. 不需要额外的硬件或者软件。
分析数据包括:
a) 细胞覆盖面积
b) 终止速度(平均≥5个图像)
c) 加速特征(平均≥5个图像)
d) 概览图
e) 中间接合处的近似值(平均≥5个图像)
ibidi的伤口愈合成像分析解决方案可以评估细胞迁移,仅仅通过4步就可以得到结果。
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