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具有3 x 7孔的可灌注通道µ-Slide,用于长期球体培养和高端显微镜观察
非常适合在Bioinert表面上长期培养和灌注3D球体或类器官
灵活的灌注准备:球体可以直接在孔中转移或产生
出色的光学质量成像室,用于高分辨率显微镜成像
应用领域:
●三维细胞聚集体(例如球体和类器官)的培养和高分辨率显微镜
●与ibidi Pump System或任何其他带Luer连接器的泵设备一起使用
●在长期培养过程中灌注球体以提供新鲜的培养基,并获得球体的生长动力学
●直接在孔中产生球体
●球体研究以用于下游处理(例如,免疫荧光,组织学和生化测定)
●细胞单层(贴壁细胞),悬浮细胞或共培养的灌注
●具有上下游代谢功能的单片器官设置
●活细胞成像和3D细胞聚集的显微镜检查
●活细胞和固定细胞以及细胞聚集的免疫荧光染色和高分辨率荧光显微镜
技术特征:
●优化的球体/类器官培养和显微镜成像孔设计
●一张载玻片 多可分析21个样品
●灌注可用于3D细胞聚集体培养过程中的营养供应
●开放式孔格式可轻松进行样品制备-用盖玻片轻松封闭孔以适用于流体培养
●通道创建孔的简单流体连接
●鲁尔接头使泵连接变得容易(例如,与ibidi泵系统连接)
●提供三种表面:
●生物惰性的表面完全钝化,无细胞粘附
●无涂层,可大程度地减少细胞粘附和悬浮细胞
●ibiTreat(经组织培养处理)可实现细胞粘附
●可以通过ibidi Polymer Coverslip底部使用高分辨率荧光显微镜观察样品
●与染色和固色液兼容
●与DIC盖一起使用时兼容微分干涉对比(DIC)显微镜
●由完全生物相容的材料制成
µ-Slide球体灌注培养原理:
µ-Slide球体灌注是用于培养自由漂浮的3D聚集体的专用流动室。它由3 x 7平底孔组成,这些孔通过上方的通道连接。每个孔形成自己的壁,在此培养标本。
通过通道进行灌注时,新鲜培养基会持续扩散到样本中。这样可确保在整个实验过程中获得营养和氧气扩散,而样品不会受到明显的剪切力。
该设置可确保实现 的生存能力,但对球体,类器官或组织的剪切应力 小。
此处显示的是µ-Slide椭球体灌注的单孔中的计算流体动力学(CFD)模拟。 针对底部壁fluid中的标本优化了每个孔的流体特性。请注意,剪切力在上部孔区占主导地位,而生态位受到保护。
µ-Slide球体灌注载玻片是一个薄的ibidi聚合物盖玻片底部,该底盖具有 高的光学质量(与玻璃相比),非常适合高分辨率显微镜检查。与油浸显微镜和荧光成像的兼容,使µ-Slide球体灌注成为理想的球体成像室。
实验工作流程
µ-Slide球体灌注是一项革命性的技术,可为球体,类器官或组织创造理想的条件。它还允许它们同时培养和成像。
优点:
●营养和气体扩散
●减少细胞凋亡和坏死
●增大球体尺寸和寿命
●长期培养具有出色的生存力和增殖能力
●成熟度提高
播种预成型的球体
通过简单的工作流程,可以使用移液器轻松地将现有3D细胞聚集体放入孔中。关闭孔后,用培养基填充通道,并使用ibidi Pump System或任何其他细胞培养泵开始灌注。可以使用所有常用步骤和方法(例如,悬滴,液体覆盖,ULA平板或生物反应器)生成球体。µ-Slide球体灌注本身不需要任何嵌入的基底,支架或支撑结构。
孔内球体的形成
或者,可以在带有Bioinert表面的µ-Slide球状体灌注孔内直接生成球状体。这种自组织过程是一种简单且省时的方法,可在每个单孔中生成均质的球体。
三维细胞聚集体可以很容易地回收用于下游应用,例如组织学,蛋白质谱分析和进一步培养。
µ-Slide球体灌注的应用
µ-Slide球体灌注是一种易于使用的微流生物反应器,适用于多细胞3D聚集体的多种应用。可选择地,单个细胞在附着到孔底时可用作悬浮培养物或用作细胞单层。此外,可以将多种细胞类型组合在一个孔中,以创建长期的共培养系统。µ-Slide球体灌注的革命性技术提供了一种 且可重现的方法,可以同时对标本进行生长和成像。
应用实例
灌注培养时高度改善的球状体生长速率
L929成纤维细胞在µ-Slide球状体灌注中显示出球状体,Bioinert,第1至14天,接种浓度为5 x 10 5单细胞/ ml。左:无灌注, 天换培养基。右:使用ibidi泵系统灌注,0.75毫升/分钟。相差显微镜,10倍物镜,孔直径800 µm。
贴壁细胞荧光成像
接种后2小时固定在µ-Slide球形灌注液ibiTreat中的L929成纤维细胞的荧光成像。绿色:F-肌动蛋白(phalloidin);蓝色:核(DAPI)。宽视野荧光显微镜,10倍物镜。
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